Esta entrada está yendo fenomenal. He recordado que os dije que os pondría un vídeo sobre cómo se preparan las muestras biológicas para el microscopio óptico. Aquí os lo dejo, junto con otros videos (es una lista de reproducción) a los que podéis echar un vistazo, sobre aspectos de diferentes tipos de técnicas.
Los microscopios. Este ejercicio va sobre averiguar cómo funcionan los diferentes tipos de microscopios que se utilizan hoy día y que producen imágenes de una belleza insospechada. Quiero que miréis las fotos que se observan en esta dirección http://www.madrimasd.org/blogs/ciencia_marina/2009/10/10/126308, que elijáis una e investiguéis sobre el tipo de microscopio con el que está hecha, como ejemplo os pongo una increíble cabeza de mosca
En la foto de la mosca, se ha utilizado el microscopio metalográfico. Este tipo de microscopio es de uso común para el control de calidad y producción en los procesos industriales. Con ellos, podemos realizar mediciones en los componentes mecánicos y electrónicos, permite además verificar el control de superficie y el análisis óptico de los metales.Este tipo de microscopio difiere de los biológicos en que el objeto a estudiar se ilumina con luz reflejada, porque las muestras cristalográficas son opacas a la luz.
ResponderEliminarSu funcionamiento está basado en la reflexión de un haz de luz horizontal que proviene de la fuente, dicha reflexión se produce, por medio de un reflector de vidrio plano, hacia abajo, a través del objetivo del microscopio sobre la superficie de la muestra. Parte de esta luz incidente, reflejada desde la superficie de la muestra se amplificará al pasar a través del sistema inferior de lentes, llegará al objetivo y continuará hacia arriba a través reflector de vidrio plano; después,de nuevo se amplificará en el sistema superior de lentes (ocular).
Milagros, el microscopio metalográfico suele fotografiar superficies planas y pulidas y se basa en las diferencias de brillo de cada uno de los cristales seccionados, se utiliza también además de en industría, en investigación mineralógica de minerales metálicos. No creo que sea este tipo de microscopio, más bien debe ser una buena lupa o microscopio estereoscópico. Los datos nos dicen que el aumento es pequeño (x 6,25) como en las lupas binoculares. Lo que es realmente llamativo es cómo ha debido ser iluminada la muestra, sobre esta cuestión no he encontrado nada concreto.
EliminarEn cualquier caso estaría bien que me contaras cómo has llegado a la conclusión del microscopio metalográfico, me ha resultado realmente llamativo, felicidades¡¡¡¡
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EliminarLa foto de los Filamentos de actina y microtúbulos (proteínas estructurales) en fibroblastos de ratón, está realizada con un microscopio de fluorescencia. Este microscopio hace uso de la fluorescencia y se convierte en una herramienta de inestimable valor para la investigación científica, ya que permite alcanzar altos niveles de sensibilidad y resolución microscópica, permitiendo una apreciación diferente de la información que se puede obtener de los especímenes y que generalmente pasa desapercibida.
ResponderEliminarEste consta de una fuente de luz potente que emite una radiación que bien incide en la muestra, tras atravesar un condensador de campo oscuro (iluminación transmitida) o penetrar en el tubo del microscopio formando un ángulo recto con él, para posteriormente incidir en la muestra (iluminación incidente o epi-iluminación)
He llegado a esta conclusión porque gracias a la fluorescencia se originan unas variaciones de luminosidad en los elementos estudiados, que permite diferenciarlos del resto de la muestra y observar con mayor detalle su estructura interna.
Muy bien Ana, ahora, qué te gustaría a tí comprender mejor del microscopio de fluorescencia, no sería acaso saber qué es la fluorescencia y cómo se provoca en una muestra y cómo podemos utilizarla para ver cosas distintas de la misma preparación???
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ResponderEliminarla foto de Sección sagital de cerebelo de rata, fue tomada por un microscopio de fluorescencia confoca.Este microscopio utiliza iluminación puntual y un "pinhole" en un plano óptico conjugado en frente del detector para eliminar la información que está fuera del plano focal. Sólo la luz que está dentro de este plano puede ser detectada, de modo que la calidad de imagen es mucho mejor que las de campo amplio.
ResponderEliminarCreo que has entendido bien qué significa CONFOCAL, aunque tengo alguna duda porque has incluido la palabra técnica pinhole y tu texto parece copiado, para deshacer las dudas, deberías explicar todo esto un poco más llanamente.
EliminarEn la foto de un embrión de ratón de 18.5 días, se ha utilizado el microscopio en campo oscuro. El microscopio de campo oscuro utiliza un haz enfocado de luz muy intensa en forma de un cono hueco concentrado sobre el espécimen. El objeto iluminado dispersa la luz y se hace así visible contra el fondo oscuro que tiene detrás. Por ello las porciones transparentes del espécimen quedan oscuras, mientras que las superficies y partículas se ven brillantes, por la luz que reciben y dispersan en todas las direcciones, incluida la del eje óptico que conecta el espécimen con la pupila del observador. Esta forma de iluminación se utiliza para analizar elementos biológicos transparentes y sin pigmentar, invisibles con iluminación normal, sin fijar la muestra, es decir, sin matarla.
ResponderEliminarEl objetivo recibe la luz dispersa por las estructuras del espécimen. Para lograrlo, el microscopio de campo oscuro está equipado con un condensador especial que ilumina la muestra con luz fuerte indirecta. En consecuencia el campo visual se observa detrás de la muestra como un fondo oscuro sobre el cual aparecen pequeñas partículas brillantes de la muestra que reflejan parte de la luz hacia el objetivo.
Además, también se ha utilizado la fluorescencia para poder observar el embrión. La fluorescencia es una sustancia natural en las células o un colorante aplicado al corte. Es estimulado por un haz de luz, emitiendo parte de la energía absorbida como rayas luminosas.
El microscopio de campo oscuro destaca los bordes de un objeto, cómo es que vemos todo el embrión con nitidez? Además me gustaría que me investigaras de qué modo han aplicado la fluorescencia. Ha estado bien tu respuesta.
EliminarEn la imagen del rotífero alimentandose se utiliza el microscopio de contraste de fases. Éste microscopio se usa principalmente para aumentar el contraste entre las partes claras y oscuras de las células sin colorear. El microscopio de fase ilumina el espécimen con un cono hueco de luz, como en el microscopio en campo oscuro. Sin embargo en el microscopio de fase el cono de luz es más estrecho y entra en el campo de visión del objetivo, que contiene un dispositivo en forma de anillo que reduce la intensidad de la luz y provoca un cambio de fase de un cuarto de la longitud de onda. Este tipo de iluminación provoca variaciones minúsculas en el índice de refracción de un espécimen transparente, haciéndolo visible.
ResponderEliminarY especialmente nítido. Muy bien.
EliminarEn la foto de la Pleurosigma ( diatomeas marinas), se ha utilizado un microscopio en campo oscuro con luz polarizada reflejada. Este microscopio se utiliza para preparados biológicos no teñidos (bacterias o cultivos celulares vivos), aquí la apertura de la iluminación que se utiliza para iluminar el preparado es más grande que la del objetivo empleado.
ResponderEliminarEn campo oscuro solamente los rayos de luz difractados y dispersados, entran en el objetivo. Incluso hasta estructuras finas, que en parte están fuera del poder resolutivo del microscopio óptico, pueden ser resueltas, apareciendo claramente brillantes sobre un fondo oscuro (esto lo podemos verificar en la imagen elegida de la Pleurosigma).
A demás se ha utilizado la luz polarizada para que los prismas dejen pasar únicamente la luz que vibra en un único plano, esta luz produce en el campo del microscopio claridad u oscuridad según los prismas.
Has elegido una foto de gran belleza, las diatomeas son organismos unicelulares fotosintéticos que están recubiertos por un estuche muy delicado de sílice (el nombre técnico es frústulo). Es como si estuvieran dentro de una cajita de cristal. Cuando la luz oblícua del campo oscuro es además filtrada por el polarizador, se destacan los colores de interferencia de la cajita de cristal. Lo has explicado bastante bien. Hablaremos sobre las diatomeas dentro de muy poco...
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